生物素与亲和素/链霉亲和素的结合具有高度特异性和稳定性,两者的亲和常数比抗原-抗体反应高10-100万倍,这使得它成为蛋白质生物化学中的一个非常好的工具。然而,高质量的生物素标记蛋白的生产目前是一个重大的挑战。研究人员经常遇到的技术问题,包括不能充分标记,高批次间差异,和不可预知的性能表现。此外,生物素标记方法的选择也会显著影响最终的结果。每一个目标蛋白都有着自己独特的生化特性,因此需要定制化的解决方案。
这些复杂的因素使得个人实验室很难制造和使用生物素结合物,同时,很少有商业化的产品可供购买。为了填补这一空白,ACROBiosystems公司开发出了一系列独家的预先标记且经实验验证的生物素标记重组蛋白。MABSOL®生物素标记蛋白包含超过上百种常用的药物靶点和生物标志物蛋白。我们以高质量的人源细胞表达的蛋白为原料,每一步都经过充分考量,以达到较高的生物活性和检测灵敏度。我们还使用严格的质量控制,以确保较小的批次间差异。
MABSOL®生物素标记蛋白系列包括两个独特的互补产品系列,分别是建立在Avitag™技术上的PrecisionAvi系列(查看产品列表),和使用内部开发的化学标记法的UltraLys系列(查看产品列表)。具有严格的细节要求和质量检测标准
酶通过调节化学反应的速率,在生物体中充当生物催化剂,而自身在此过程中不会发生改变。酶充当药物的靶标以获得所需的治疗效果,因此被称为生物靶标。酶为药物设计提供了独特的机会,这是细胞表面受体、核激素受体、离子通道、转运体所不具备的。用作酶抑制剂的药物构成了当今临床使用的口服生物可利用治疗剂的重要部分。
ACROBiosystems百普赛斯作为药物开发用重组蛋白的行业领导者,致力于“从靶点蛋白开始,为更好生物医药”,开发了一系列靶点酶产品,包括但不限于腺苷酸通路靶点、基质金属蛋白酶、组织蛋白酶、激酶等,助力相关药物及疗法的开发。
mRNA合成过程中,通过Vaccinia Capping System对mRNA的5'端进行加帽修饰,并使用Poly(A)Polymerase在3'端进行加尾修饰。为了提高翻译效率、增强稳定性,并抑制不良反应,选择了高活性的T7 RNA Polymerase和经过突变的核糖核酸单体。
ACROBiosystems百普赛斯针对mRNA合成和修饰的挑战开发了一系列工具酶产品。这些产品包括Poly(A)Polymerase、T7 RNA Polymerase、Pyrophosphatase、RNase Inhibitor和DNase I等,它们具有高纯度、高活性、低内毒素、无重金属和宿主酶残留等特点。这些工具酶产品能够解决mRNA产品开发中的多个难题,如提高加帽效率、统一加尾序列、增强合成序列的稳定性以及促进脂质体进入细胞等方面。
我们通过严格的质量控制确保产品的批间一致性。每一个产品不同批次会通过多种实验方法以我们内部标准进行并行对比,只有差异在可接受范围内的产品才会被放行。就像图9. ELISA分析对比三个不同批次生物素标记的Human TNF-alpha(Cat. No. TNA-H82E3)和Adalimumab的结合,结果显示这些样品批次间差异可忽略。在细胞水平的实验中,产品同样具有很好的批间一致性(如图10所示)。
核酸工具酶种类繁多、功能各异,主要包括限制酶、聚合酶、连接酶、修饰酶和核酸酶等。这些酶具有特异性的序列识别能力以及高效的催化活性,在一定的条件下可以对核酸进行切割、连接、扩增及修饰等,反应条件温和且具有出色的生物相容性,因此,被广泛地应用于核酸、蛋白质和小分子等生物活性分子的分析检测。ACROBiosystems作为领先的重组蛋白供应商隆重推出包括全能核酸酶、CAS9、CAS12a等CAS系列核酸酶等,应用于细胞与基因工程以及对生物制品的安全性监管。
此外,ACROBiosystems百普赛斯可提供一系列高特异性工具酶,用于抗体片段化、糖基化,进一步分析抗体药结构,及其功能之间的关系,助力生物药物的开发和质量控制。
类型 | 分子 | 货号 | 产品描述 |
---|---|---|---|
全能核酸酶 | Nuclease HOT | BEE-N3116 | GENIUS™Nuclease DMF Filed |
Nuclease HOT | NUE-S5119 | GENIUS™ Nuclease, premium grade | |
Nuclease HOT | GMP-NUES19 | GMP GENIUS™Nuclease DMF Filed | |
CRISPR-Cas核酸酶 | cas9 | CA9-S5149 | GENPower™ NLS-Cas9 Nuclease (MALS verified) |
Cas12a | CAA-L5140 | GENPower™ NLS-Cas12a Nuclease (MALS verified) | |
Cas12a | CAA-L5149 | NLS-Cas12a Nuclease (MALS verified) |
类型 | 分子 | 货号 | 产品描述 | 应用 |
---|---|---|---|---|
蛋白酶 | 3C(HRV) HOT | 3CC-N3133 | HRV-3C Protease Cleavage Enzyme, GST Tag (active enzyme) | 切除融合蛋白上亲和标签 |
抗体理化分析 | IdeS | IDS-S5143 | IdeS (20U/μl) | 特异性识别IgG,在抗体下铰链区的特定位点进行酶切,使IgG水解为完整的F(ab’)2片段和Fc片段 |
SpeB | SPB-S5115 | SpeB (40U/μl) | 在还原条件下消化多物种来源和亚型抗体的铰链区,产生Fab与Fc片段 | |
Endo H | ENH-S5116 | Endo H (500U/μl) | 对N-糖蛋白中的高甘露糖和某些杂合型寡聚糖的核心壳二糖核心进行切割,而不切割复杂多糖,确定抗体的糖基化状态 | |
EndoS | ENS-S5143 | Endo S (200U/μl) | 特异性水解天然 IgG Fc 区域中的 N 连接聚糖 |
生物素标记蛋白的生物活性由蛋白自身结构和生物素标记方式决定。我们测试了多种标签和生物素标记方法,用多种结合实验进行产品评估,选择表现最好的蛋白进行生产。图1为内部评估实验举例。
我们的生物素标记蛋白在不同的应用中均具有高生物活性和极好的检测灵敏度。图2功能性ELISA实验中,生物素标记的人TACI蛋白与BAFF有较高的结合活性。图3是定向固定和随机固定两种ELISA方法的比较,结果显示通过链霉亲和素定向固定的生物素标记的CD155比随机固定的非生物素标记CD155具有更高的检测灵敏度。图4和图5实验结果表明生物素标记的PD1可以很好地应用于AlphaLISA检测其与配体PD-L1及PD-L2的结合活性。图6和图7 SPR实验中可以看出,生物素标记蛋白可以很好的用于检测蛋白与治疗性抗体的亲和力。此外,生物素标记蛋白也经常用于细胞实验中,如细胞毒性实验及CAR表达阳性率检测实验(如图8和图9所示)。
Authors: MacLeod DT et al.
Journal: Mol Ther 2017
Product: biotinylated Human CD19(Cat. # CD9-H8259)
Application: Flow Cytometry
Authors: El Amrani M et al.
Journal: J Chromatogr A 2016
Product: biotinylated human recombinant TNF-alpha(Cat. # TNA-H8211)
Application: ELISA
Authors: Kim Young Min et al.
Journal: United States Patent Application 20160136300 2016
Product: ErbB2(Cat. # HE2-H822R)
Application: ELISA
Authors: Pooja Sabhachandani et al.
Journal: Microchimica Acta 2015
Product: biotinylated human TNF-α(Cat. # TNA-H8211)
Application: Microsphere-based assay
Authors: YU et al.
Journal: United States Patent Application 20140155285 2014
Product: biotinylated TNFα(Cat. # TNA-H8211)
Application: Flow Cytometry